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人胰島素原 (PI)ELISA kit使用說明書

更新時間:2023-12-21   點擊次數:233次

人胰島素原  (PI)ELISA使用說明書

胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 , 它是由由胰島β細胞合成和分泌 , 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ,只有極少量的胰島素原釋放入血 ,在病理情 況下 ,胰島β細胞釋放胰島素原增多 ,血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結構。 它是由芝加哥大學的Donald F. Steiner教授在1967年發現的。


本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA 。往預先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測 抗體 ,HRP  酶結合物 , 中間經過溫育和洗滌 ,用底TMB  顯色 ,TMB 在過 氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色 ,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關。用酶標儀在 450nm  波長下測定

吸光度(OD   ,計算樣品濃度。

靈敏度:4.79pg/mL

檢測范圍12.5-800pg/mL

特異性:可檢測樣本中人的PI ,且與其類似物無明顯交叉反應。

image.png

濃度(pg/mL)

800

400

200

100

50

25

12.5

0

OD  

2.32

1.93

1.31

0.85

0.51

0.39

0.28

0.1

校正 OD  

2.22

1.83

1.21

0.75

0.41

0.29

0.18

-


試劑盒性能:

1.    重復性 :板內變異系數小于  10% ,板間變異系數小于  10%。

2.    回收率 :在選取的健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入  3  個不同

濃度水平的人PI ,計算回收率。

 

樣本類型

范圍(%

平均回收率(%

血清(n=8)

84- 101

96

血漿(n=8)

92- 105

102

細胞培養上清(n=8)

96- 108

105

3.    線性稀釋:分別在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入

高濃度人PI ,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋 ,評估線性。

 

稀釋比例

回收率(%

血清

血漿

細胞培養上清

12

范圍

 

84-95

 

88-97

 

90- 110

平均回收率

 

91

 

93

 

96

14

范圍

89- 103

87- 108

105- 115

平均回收率

94

98

109



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